אלקטרופורזה: מה זה, לשם מה ואיך זה נעשה

תוֹכֶן

• לשם מה זה
• איך זה נעשה
• סוגי אלקטרופורזה
• 1. אלקטרופורזה של המוגלובין
• 2. אלקטרופורזה חלבונית

אלקטרופורזה היא טכניקת מעבדה המתבצעת במטרה להפריד מולקולות על פי גודלן ומטעןן החשמלי, כך שניתן יהיה לאבחן מחלות, לאמת ביטוי לחלבון או לזהות מיקרואורגניזמים.

אלקטרופורזה היא הליך פשוט בעלות נמוכה, המשמש בשגרת מעבדה ובפרויקטים מחקריים. על פי מטרת האלקטרופורזה, ייתכן שיהיה צורך לבצע בדיקות ובחינות אחרות כדי להגיע לאבחון, למשל.

לשם מה זה

ניתן לבצע אלקטרופורזה למטרות שונות, הן בפרויקטים מחקריים והן באבחון, מכיוון שמדובר בטכניקה פשוטה וזולה.לפיכך, ניתן לבצע אלקטרופורזה כדי:

• זיהוי נגיפים, פטריות, חיידקים וטפילים, כאשר יישום זה נפוץ יותר בפרויקטים מחקריים;
• מבחן אבהות;
• בדוק את הביטוי של חלבונים;
• זיהוי מוטציות, שימושי באבחון לוקמיה, למשל;
• לנתח את סוגי ההמוגלובין במחזור, להיות שימושי באבחון אנמיה חרמשית;
• הערך את כמות החלבונים הקיימים בדם.

על פי מטרת האלקטרופורזה, ייתכן שיהיה צורך לבצע בדיקות משלימות אחרות לרופא להשלמת האבחנה.

איך זה נעשה

לביצוע אלקטרופורזה, נדרש הג'ל, שיכול להיות פוליאקרילאמיד או אגרוזה בהתאם למטרה, חיץ אלקטרופורזה ובור, סמן משקל מולקולרי וצבע פלואורסצנטי, בנוסף לציוד אור UV או LED, הידוע גם כ- Transilluminator.

לאחר הכנת הג'ל, יש למקם חפץ ספציפי כך שהבארות ייוצרו בג'ל, הנקרא בכינויו העממי מסרק, ולתת לג'ל להתייצב. כאשר הג'ל מוכן, פשוט מרחו את החומרים על הבארות. לשם כך, יש למקם סמן משקל מולקולרי באחת הבארות, בקרה חיובית, שהיא החומר שידוע במה מדובר, בקרה שלילית, המבטיחה את תוקף התגובה, והדגימות שניתנות. יש לערבב את כל הדגימות עם צבע פלואורסצנטי, מכיוון שכך ניתן לדמיין את הלהקות בתא הזרע.

יש למקם את הג'ל עם הדגימות בבור האלקטרופורזה, המכיל את תמיסת החיץ הספציפית, ואז מפעילים את המכשיר כך שיהיה זרם חשמלי וכתוצאה מכך, הבדל פוטנציאלי, שחשוב לחלקיקי ההפרדה על פי שלהם. עומס וגודל. זמן הריצה האלקטרופורטי משתנה בהתאם למטרת ההליך ויכול להימשך עד שעה.

לאחר הזמן שצוין, ניתן לראות את תוצאת הריצה האלקטרופורטית דרך הזרע. כאשר הג'ל מונח תחת אור UV או LED, ניתן לדמיין את דפוס הלהקה: ככל שהמולקולה גדולה יותר, כך נדידתה קטנה יותר, מתקרבת לבאר, בעוד שככל שהמולקולה קלה יותר, כך פוטנציאל הנדידה גדול יותר.

כדי לאמת את התגובה, יש לדמיין את רצועות הבקרה החיובית ואין לדמיין דבר בבקרה השלילית, שכן אחרת זוהי אינדיקציה לכך שהיה זיהום, ויש לחזור על התהליך כולו.

סוגי אלקטרופורזה

ניתן לבצע אלקטרופורזה למטרות שונות ובהתאם למטרתה ניתן להשתמש בכמה סוגים של ג'ל, הנפוצים ביותר הם פוליאקרילאמיד ואגרוזה.

אלקטרופורזה לזיהוי מיקרואורגניזמים נפוצה יותר לבצע במעבדות מחקר, אולם למטרות אבחון ניתן להשתמש באלקטרופורזה לזיהוי מחלות המטולוגיות ומחלות המתפתחות עם הגידול בכמות החלבונים, בהיותם הסוגים העיקריים של אלקטרופורזה:

1. אלקטרופורזה של המוגלובין

אלקטרופורזה של המוגלובין היא טכניקת מעבדה המתבצעת כדי לזהות את סוגי ההמוגלובין המסתובבים בדם, ומאפשרת לזהות נוכחות של מחלות הקשורות לסינתזת המוגלובין. סוג ההמוגלובין מזוהה באמצעות אלקטרופורזה ב- pH ספציפי, באופן אידיאלי בין 8.0 ל- 9.0, עם דפוס של רצועות שניתן להשוות לתבנית הרגילה, ומאפשר זיהוי של המוגלובינים לא תקינים.

בשביל מה הוא מיועד: אלקטרופורזה של המוגלובין מתבצעת על מנת לחקור ולאבחן מחלות הקשורות לסינתזת המוגלובין, כגון אנמיה חרמשית ומחלת המוגלובין C, בנוסף להיותה שימושית בהבחנה בין תלסמיה. למד כיצד לפרש אלקטרופורזה של המוגלובין.

2. אלקטרופורזה חלבונית

אלקטרופורזה חלבונית היא בדיקה אותה מבקש הרופא להעריך את כמות החלבונים המסתובבים בדם וכך לזהות מחלות. בדיקה זו נעשית מדגימת דם, אשר צנטריפוגה לקבלת פלזמה, החלק של הדם המורכב בין חומרים אחרים מחלבונים.

לאחר אלקטרופורזה, ניתן להמחיש דפוס של רצועות ובהמשך, גרף בו מצויין הכמות של כל שבר חלבונים, המהווה יסוד לאבחון.

בשביל מה הוא מיועד: אלקטרופורזה חלבונית מאפשרת לרופא לחקור את המופע של מיאלומה נפוצה, התייבשות, שחמת, דלקת, מחלות כבד, דלקת בלבלב, זאבת ויתר לחץ דם על פי דפוס הלהקה והגרף המוצג בדוח הבדיקה.

להבין כיצד זה נעשה ואיך להבין את התוצאה של אלקטרופורזה חלבונית.